CARM1与HIF1A存在关联并直接相互作用
第一步：筛选CARM1的互作蛋白
用anti-Flag-CARM1 IP-MS技术鉴定CARM1的互作蛋白，结果发现CARM1和HIF1A有“关联”！🔗 （图1a：CARM1和HIF1A的互作初步证据）
第二步：验证CARM1与HIF1A的相互作用
在常氧和缺氧条件下做了Co-IP实验，结果CARM1和HIF1A真的互作！🤝 GST pulldown实验也进一步证实了这一点！ （图1b-g：Co-IP和GST pulldown实验结果）
第三步：确定互作的具体位置
为了搞清楚CARM1和HIF1A的互作细节，构建了CARM1的截短载体： EVH1结构域（1-140 aa） cat结构域（141-480 aa） c结构域（481-608 aa） 结果发现，CARM1的EVH1结构域是负责与HIF1A互动的“关键区域”！🔑 （图1h-j：GST pulldown实验结果） 另外，HIF1A的TAD结构域（601-826 aa）也负责与CARM1互动哦！ （图1l-m：HIF1A的TAD结构域实验结果）
第四步：CARM1与HIF1A的“合作”调控基因表达
CARM1和HIF1A不仅互作，还一起调控了一些重要基因的表达！ 比如： CDK4 Cyclin D1 β-Catenin HIF1A MALAT1 SIX1 这些基因的启动子都有HIF-1结合序列，CARM1直接调控了缺氧信号通路！ （图1n-o：荧光素酶实验和BIOBASE分析结果）
总结 CARM1和HIF1A的“互动”不仅体现在直接结合上，还通过调控基因表达影响了缺氧信号通路！
🌟 这个发现为未来的研究提供了新的方向，期待更多有趣的成果！🔬
如有相关科研问题，欢迎留言探讨。
第一步：筛选CARM1的互作蛋白
用anti-Flag-CARM1 IP-MS技术鉴定CARM1的互作蛋白，结果发现CARM1和HIF1A有“关联”！🔗 （图1a：CARM1和HIF1A的互作初步证据）
第二步：验证CARM1与HIF1A的相互作用
在常氧和缺氧条件下做了Co-IP实验，结果CARM1和HIF1A真的互作！🤝 GST pulldown实验也进一步证实了这一点！ （图1b-g：Co-IP和GST pulldown实验结果）
第三步：确定互作的具体位置
为了搞清楚CARM1和HIF1A的互作细节，构建了CARM1的截短载体： EVH1结构域（1-140 aa） cat结构域（141-480 aa） c结构域（481-608 aa） 结果发现，CARM1的EVH1结构域是负责与HIF1A互动的“关键区域”！🔑 （图1h-j：GST pulldown实验结果） 另外，HIF1A的TAD结构域（601-826 aa）也负责与CARM1互动哦！ （图1l-m：HIF1A的TAD结构域实验结果）
第四步：CARM1与HIF1A的“合作”调控基因表达
CARM1和HIF1A不仅互作，还一起调控了一些重要基因的表达！ 比如： CDK4 Cyclin D1 β-Catenin HIF1A MALAT1 SIX1 这些基因的启动子都有HIF-1结合序列，CARM1直接调控了缺氧信号通路！ （图1n-o：荧光素酶实验和BIOBASE分析结果）
总结 CARM1和HIF1A的“互动”不仅体现在直接结合上，还通过调控基因表达影响了缺氧信号通路！
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