Fluo-4钙离子检测试剂盒
Fluo-4 钙离子检测试剂盒是一种常用于细胞内钙离子浓度检测的工具，以下是其详细介绍：
检测原理
· Fluo-4 是一种对钙离子具有高亲和力的荧光染料，属于钙黄绿素类荧光探针。它本身荧光较弱，但与细胞内的钙离子结合后，会发生荧光增强现象。
· 试剂盒利用这一特性，将 Fluo-4 AM（Fluo-4 的乙酰甲酯形式）导入细胞。Fluo-4 AM 具有亲脂性，能够自由透过细胞膜进入细胞内。在细胞内的酯酶作用下，Fluo-4 AM 的酯键被水解，释放出 Fluo-4，Fluo-4 随即与细胞内的钙离子结合，产生强烈的绿色荧光。通过检测荧光强度的变化，就可以实时反映细胞内钙离子浓度的动态变化。
试剂盒组成
· Fluo-4 AM：是核心荧光染料，用于与细胞内钙离子结合并产生荧光信号。
· Pluronic F-127：一种表面活性剂，通常用于帮助 Fluo-4 AM 溶解，并促进其进入细胞。
· 缓冲液：一般包括细胞加载缓冲液和清洗缓冲液等。细胞加载缓冲液用于配制 Fluo-4 AM 工作液，使染料能够均匀地加载到细胞中；清洗缓冲液用于在染料加载后清洗细胞，去除未进入细胞的多余染料。
· 阳性对照试剂：如离子霉素等，可用于诱导细胞内钙离子释放，作为阳性对照来验证试剂盒的有效性和检测系统的正常工作。
产品特点
· 高灵敏度：对钙离子具有较高的亲和力和特异性，能够检测到细胞内微小的钙离子浓度变化，即使在钙离子浓度较低的情况下，也能产生明显的荧光信号。
· 快速响应：与钙离子结合迅速，能够实时反映细胞内钙离子浓度的动态变化，适用于研究快速的钙离子信号转导过程。
· 低细胞毒性：Fluo-4 AM 及其代谢产物对细胞的毒性较低，在正常实验条件下，不会对细胞的生理功能产生明显影响，能够保证细胞在检测过程中的活性和正常生理状态。
· 多检测平台兼容：产生的荧光信号可通过多种仪器进行检测，如荧光显微镜、流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪等，满足不同实验需求和研究场景。
使用方法
· 细胞准备：将待检测的细胞培养至合适的密度，根据细胞类型和实验要求，进行相应的处理，如传代、饥饿、刺激等，使细胞处于所需的生理状态。
· 染料加载：用细胞加载缓冲液将 Fluo-4 AM 稀释成适当浓度的工作液，加入到细胞培养体系中，在适宜的温度和时间条件下孵育，使 Fluo-4 AM 进入细胞并被酯酶水解为 Fluo-4。
· 清洗细胞：孵育结束后，用清洗缓冲液轻轻洗涤细胞，去除未进入细胞的 Fluo-4 AM 及其他杂质。
· 检测荧光：将细胞置于相应的检测仪器中，选择合适的激发光和发射光波长进行检测。通常 Fluo-4 的激发波长在 488nm 左右，发射波长在 520nm 左右。根据实验目的和仪器设备，可进行实时荧光监测、荧光图像采集或荧光强度定量分析等。
应用领域
· 细胞生物学研究：用于研究细胞内钙离子信号通路，如细胞的增殖、分化、凋亡、迁移等过程中钙离子的作用机制。
· 神经科学领域：可用于检测神经元细胞内钙离子浓度的变化，研究神经元的兴奋性、突触传递、神经递质释放等生理过程，以及神经系统疾病相关的钙离子异常机制。
· 心血管研究：在心肌细胞、血管平滑肌细胞等研究中，监测钙离子浓度变化对于了解心肌收缩、血管舒张等生理功能以及心律失常、高血压等心血管疾病的发病机制具有重要意义。
· 药物研发：作为药物筛选和药效评价的工具，评估药物对细胞内钙离子通道、钙信号转导途径的影响，筛选具有调节钙离子功能的新型药物。
技术支持
亚科因（武汉）生物技术有限公司
Abbkine亚科因致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键生化检测试剂盒的研发、生产和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。